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Frank H. Stephenson
Übersetzt von Kerstin Mahlke
Mathematik im Labor
Ein Arbeitsbuch für Molekularbiologie und Biotechnologie
erschienen März 2005 259 Seiten, 29 Abb, Paperback
Spektrum-Akademischer Vlg | ISBN: 3827415969
| |  | 29.95 EUR |  | | |
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| VORWORT | öffnen |
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VorwortMit meinem Chemielehrer war ich selten auf der gleichen Wellenlänge. Wir konnten uns zum Beispiel nie auf die richtige Kleidung und Haarlänge für einen Oberstufenschüler einigen. Auch verstand er nicht, dass Surfen ein wirkliches Karriereziel sein kann, und rauchte außerdem zuviel. Doch trotz oder gerade wegen dieses Lehrers lernte ich schließlich die Mathematik, die der Berechnung der Konzentration von Lösungen zugrunde liegt, und ich stimmte ihm letzlich darin zu, das Zahlen in den biol...
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| KLAPPENTEXT | öffnen |
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Niemand in den Biowissenschaften kommt heute ohne Mathematik und Informatik aus. Überall in der Molekularbiologie und Biotechnologie werden Computer genutzt, um Berechnungen und Sequenzanalysen durchzuführen, Messwerte zu interpretieren, Modellierungen vorzunehmen und Hypothesen zu testen. Das vorliegende Praxisbuch Mathematik im Labor führt den Leser durch die quantitativen Aspekte der Laborarbeit und vermittelt ihm ein besseres Gefühl dafür, wie sich verlässliche Ergebnisse erzielen und optim... [weiter lesen] |
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| AUTOR | öffnen |
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Frank H. Stephenson ist Senior Technical Manager in der Weiterbildungsabteilung des amerikanischen Biotechnologie-Unternehmens Applied Biosystems in Foster City, California. Das vorliegende Buch profitiert von seinen Erfahrungen als Leiter zahlreicher Kurse im Bereich der genetischen Analyse - unter anderem zu DNA-Sequenzierung, Forensik, Oligonucleotidsynthese, PCR und dem Nachweis von Einzelnudeotidpolymorphismen - sowie von seiner Lehrtätigkeit an der University of Californa in Berkeley und a... [weiter lesen] |
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| INHALTSVERZEICHNIS | öffnen |
Inhaltsverzeichnis Vorwort XI 1 Wissenschaftliche Notation und metrische Vorsilben 1 Einleitung 1 Signifikante Stellen 1 Runden signifikanter Stellen bei Berechnungen 2 Exponenten und wissenschaftliche Notation 3 Ausdrücken von Zahlen in wissenschaftlicher Notation 4 Umwandlung von Zahlen aus der wissenschaftlichen Notation in Dezimalnotation 6 Addieren und Subtrahieren in wissenschaftlicher Notation geschriebener Zahlen 7 Multiplizieren und Dividieren in wissenschaftlicher Notation geschriebener Zahlen 8 Metrische Vorsilben 12 Umrechnungsfaktoren und Kürzen von Ausdrücken 12 2 Lösungen, Gemische und Medien 16 Einleitung 16 Berechnung von Verdünnungen: Ein allgemeiner Ansatz 16 Konzentration um einen Faktor X 18 Herstellung in Prozent angegebener Lösungen 20 Verdünnen in Prozent angegebener Lösungen 21 Mol und Molekülmasse: Definitionen 25 Molarität 26 Verdünnen molarer Lösungen 28 Umwandlung von Molarität in Prozent 29 Umwandlung von Prozent in Molarität 30 Normalität 31 pH 32 3 Zellwachstum 38 Die bakterielle Wachstumskurve 38 Arbeiten mit der Zellkonzentration 42 Auftragen der OD 550 gegen die Zeit im linearen Koordinatensystem 44 Auftragen des Logarithmus der OD 550 gegen die Zeit im linearen Koordinatensystem 4... Berechnung der Generationszeit 47 Auftragen von Zellwachstumsdaten im halblogarithmischen Koordinatensystem 50 Direkte Bestimmung der Generationszeit durch Auftragen der Zellkonzentration gegen di... Auftragen der Zelldichte gegen die OD 550 im halblogarithmischen Koordinatensystem ... Der Fluktuationstest 56 Beispiel für einen Fluktuationstest 57 Varianz 59 Messen der Mutationsrate 61 Bestimmung der Mutationsrate auf Agarplatten 68 Messen der Zellkonzentration im Hämocytometer 70 4 Arbeiten mit Bakteriophagen 71 Einleitung 71 Multiplizität der Infektion 71 Wahrscheinlichkeiten und Multiplizität der Infektion 73 Messen des Phagentiters 79 Verdünnen von Bakteriophagen 80 Messen des Phagenertrags 82 5 Quantitative Bestimmung von Nucleinsäuren 85 Quantitative Bestimmung von Nucleinsäuren mittels UV-Spektroskopie 85 Bestimmung der Konzentration doppelsträngiger DNA 86 Berechnung der Konzentration doppelsträngiger DNA mittels Absorption und Extinktionsk... Berechnung einer millimolaren (mM) DNA-Konzentration 90 Bestimmung der Konzentration einzelsträngiger DNA-Moleküle 91 Quantifizierung von Oligonucleotiden 94 Messen von RNA-Konzentrationen 98 Molekülmasse, Molarität und Nucleinsäurelänge 98 Abschätzen der DNA-Konzentration auf einem Ethidiumbromidgel 102 6 Markierung von Nucleinsäuren mit Radioisotopen 103 Einleitung 103 Einheiten zur Messung der Radioaktivität: das Curie 103 Abschätzung der Plasmidkopienzahl 104 Markierung von DNA mittels Nick-Translation 106 Markierung von DNA mit zufallsgemäß erzeugten Primern (Random Primer Labeling) 108 Markierung von 3'-Enden mit Terminaler Transferase 112 cDNA-Synthese 114 Homopolymer-Tailing 120 In vitro-Transkription 124 7 Oligonucleotidsynthese 127 Einleitung 127
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Index Aabhängige Variable 166 Absorption 39, 51, 85-87, 89, 93, 96, 130, 225 f., 228, 231-234, 237, 239 Absorptionskoeffizient 89, 226, 228 Absorptionskonstante 89 Absterbephase 44 Addition 23 Aminosäureeinbau 245 Amplicons 136 Amplifikation 134, 136, 141 f., 159 Annealing (PCR) 134, 148 Antilog(arithmus) 34, 50, 62, 139 Äquivalenzpunkt 162, 170 Assoziativgesetz der Multiplikation 9 Atto 12 Ausbeute pro Schritt (Oligonucleotidsynthese) 130 f. Avogadro-Zahl 25 B ß-Galactosidase 197, 225, 228, 236-239 bakterielle Wachstumskurve 38 Bakteriophagen 56, 71 84 Bakteriophage Lambda 71, 74, 79, 102, 180-182, 187-189 Bakteriophagenverdünnung 79 f. Bakteriophage Tl 56, 79 Base 35 Basis 3, 32 f., 45 Beersches Gesetz 89 best fit 166, 214 Bestimmtheitsmaß 171 Bibliothek (Bank) - cDNA 196 f. - genomische 182, 195 - Screening 199 - Expressionsbank 197 Bradford-Test 234 CCAT-Test 241, 244 cDNA 114 f., 117 f., 161 f. cDNA-Banken 196 f. cDNA-Synthese 114 f., 117-119 Codons 203 f. Concatemer 182, 189 Coomassie Brilliant Blue 234 Counts pro Minute (cpm) 103 Curie 103 DDalton 92 dekadischer Logarithmus 32, 45, 139 Deletionen, verschachtelte 220 Denaturierung 134, 142 Desoxynucleosidtriphosphate 134, 155 Detritylierung 127, 130 Dezimalform 6, 62 Dimensionsanalyse 17 f. Division 19 DMT-Kationen-Test 130 DNA - einzelsträngige, Konzentration 91-93 - Größenbestimmung 209 - Konzentration auf Ethidiumbromidgel 102 - Markierung mit Nick-Translation 106-109 DNA-Polymerase 106, 134, 158-160, 196 - Fehlerrate bei PCR 159 DNA-Sonde 199, 208 dNTPs 103, 106-109, 114-119, 121 f., 155-157 dpm 103 f. EEcoRl 178 f., 180 einzelsträngige DNA (ssDNA) 91-94, 101 f., 196 Enthalpie 150 f. Enthalpieänderung, ΔH° 150 Enthalpiebeitrag (ΔH°e) 152 Erststrang-cDNA-Synthese 114 f., 118 f. Escherichia coli 56, 174 Ethidiumbromid 102, 161 f. Exponent 3, 5-7, 9-11, 14, 32 f., 45 Exponentengesetze 8 exponentielle Amplifikation 136 Expressionsbanken 197 Extensionsschritt 134 Extinktion (PCR) 87 - Extinktionskoeffizient 89, 95 f., 226-229 - DNA-Basen 96 - Oligonucleotide 95 FFehlerrate der DNA-Polymerase 159 Femto 12 Fluktuationstest 56 f., 61 f., 64 Formelmasse 25 Fragment-Enden 177 freie Energie 150-152 FW 25 Gg-Kraft 248, 250 G/C-Gehalt 149 Gelelektrophorese 161, 209 Generationszeit 47, 49, 51 f., 54 genetischer Code 204 Genexpression 236 genomische Bank 182, 195 Genspleißen 174 Gesamtausbeute 130 f. Giga 12 Gleichheit bei der Addition 23 Gleichheit bei der Multiplikation 19 Glucose 20, 25, 236 Hhalblogarithmisches Koordinatensystem 50-52, 54 f., 215 Hämocytometer 70 Henderson-Hasselbalch-Gleichung 35-37 Hexamer 108 Hexanucleotid 108 Hind-III 102, 175 Homopolymer-Tailing 112, 120 Hybridisierung - Bedingungen 202 - mit doppelsträngigen DNA-Sonden 208 Hydroniumion 32 Hydroxylion 32 Iin vitro-Transkription 124 in vitro-Translation 245 infective centers (IC) 82 Insert 180, 182, 184 f., 190 inverser Logarithmus 50 KKa 36 Kalorie 150 Kilo 12 Kilobase 13 kohäsive Enden 174, 180 Kolonien 38-40, 57 f., 199 Kommutativgesetz der Multiplikation 8-10 kompetitive PCR 161 f. konjugierte Base 35 f. konjugierte Säure 35 f. Konzentrationsbestimmung - Protein 225 f., 233 - einzelsträngige DNA 91-93 - doppelsträngige DNA 86 Korrelationskoeffizient 173, 215 Kriterien-Variable 166 Kürzen von Ausdrücken 12 Klonierung 71, 174 f., 195 Llag-Phase 44 Ligation 180, 182, 189 Lambdavektoren 182 - Plasmidvektoren 189 lineare Regression 166, 214 Logarithmus (log) 32-34, 45-47, 62 f., 139, 202 Luciferaseaktivität 244 In, natürlicher Logarithmus 62, 74, 159 log-Phase (Zellwachstum) 104, 236 f. MM 13 71, 79, 92 f. Markierung von DNA mit Nick-Translation 106 -109 mit Random-Primern 108 mit Terminaler Transferase 112 f. Markierung von Nucleinsäuren 103 Matrize 134-136, 161 f. maximaler Radius (Rotor) 250 f. Mega 12 metrische Vorsilben 1, 12 f. Mikro 12 Mikroliter 12 f. Milli 12 minimaler Radius (Rotor) 249 Mittelwert 58 f., 167 f. mittlerer Radius (Rotor) 249 MOI 71, 75, 77, 82 Mol 12, 25 molarer Extinktionskoeffizient 226, 228 Molarität 26, 29-31, 98, 185, 230 - Umwandlung von Prozent 30 Molekülmasse (Molekulargewicht, MW) 25 f., 29, 31, 92, 98 Multiplikation 8 f., 19 Mutationsrate 61, 64 - Bestimmung durch Ausplattieren 79 - Bestimmung mit Fluktuationstest 62, 64 - Bestimmung mit Poisson-Verteilung 62, 64 MW (Molekulargewicht), siehe Molekülmasse NNano 12 Nanogramm 12 natürlicher Logarithmus 62, 74, 159 Nearest-Neighbour-Wechselwirkungen 150-152 Nick-Translation 106-109 Nomogramm 251 Normalität 31 Nucleinsäuren 71, 85, 103, 127 - quantitative Bestimmung 231, 233 - Verunreinigungen 231, 233 OOD-Einheit 94, 128 f. Oligonucleotide 94, 127 f., 203 - Konzentration 94-96 - quantitative Bestimmung 94 - Sonden 201-203 - Synthese 127 f. ONP 236 ONPG 236 optische Dichte (OD) 38, 87, 94, 128 Oxidation 127, 244 PPCR, siehe Polymerasekettenreaktion PCR-Zyklus 134, 136 PFU 79, 82 f., 187-189 Phagen 56, 71-84 Phage Lambda 71, 74, 79, 102, 180-182, 187-189 Phage Tl 56, 79 Phagenertrag 82 Phagentiter 79 Pico 12 pKa 35 Plaque 56, 79 f., 82, 199 plaque-forming unit (PFU) 79, 82 f., 187-189
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