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Inhaltsverzeichnis
Vorwort zur 5. AuflageVII
DankVII
AbkürzungenXII
Das Konzept des Experimentators 1
1 Das tägliche Brot 3
1.1 Puffer herstellen 3
1.2 Protein bestimmen 4
1.2.1 BCA-Test 5
1.2.2 Bradford-Test 5
1.2.3 Lowry-Test 5
1.2.4 Der Starcher-Test (für geduldige Forscher)6
1.2.5 Pilztest 7
1.2.6 Weniger beliebte, aber gute Methoden 9
1.3 Gele 10
1.3.1 SDS-Gele 10
1.3.2 Für Eilige: SDS-Elektrophorese ohne Sammelgel 13
1.3.3 Native Gele 14
1.4 Gele färben 15
1.4.1 Fixieren 15
1.4.2 Färben 15
1.4.3 Trocknen 23
1.5 Fällen und Konzentrieren 24
1.5.1 Denaturierende Fällung 24
1.5.2 Native Fällung 25
1.5.3 Konzentrieren 25
1.6 Blotten 27
1.6.1 Proteinfärbung auf Blots 29
1.6.2 Blocken 31
1.6.3 Immunfärbung 32
1.6.4 Ca 2+-Bindung 34
1.6.5 Ligandenfärbung 34
1.6.6 Ablösen von Proteinen von Blots 35
1.7 Autoradiographie von Gelen und Blots 35
2 Ligandenbindung 38
2.1 Radioaktive Ligandenmarkierung 39
2.1.1 lodierung von Peptiden und Proteinen 39
2.1.2 lodierung von Molekülen mit niedrigem MG 43
2.1.3 Isolierung einzelner iodierter Spezies 43
2.1.4 Vor- und Nachteile des Iodierens 44
2.1.5 Tritiieren 46
2.2 Bindung 47
2.2.1 Isolierung von Membranen 47
2.2.2 Bindungstest 56
2.2.3 Bindungstests mit Membranen 58
2.2.4 Entwicklung von Membranbindungstests 60
2.2.5 Bindungstests mit löslichen Proteinen 61
2.2.6 Keine Bindung, was tun?79
2.3 Auswertung von Bindungsdaten 81
2.3.1 Die Bindung ist im Gleichgewicht 81
2.3.2 Kinetik 95
2.4 Vernetzen von Liganden 97
2.4.1 Dreikomponentenvernetzung (3 K-Vernetzung)98
2.4.2 Photoaffinitätsvernetzung 102
2.4.3 Kontrollen bei Vernetzungsversuchen 104
2.5 Sinniges 105
3 Membranproteine solubilisieren 109
3.1 Seifen 110
3.1.1 Saubere Begriffe 110
3.1.2 Vom Umgang mit Seifen 112
3.2 Solubilisieren 116
3.2.1 Solubilisierungskriterien 120
3.2.2 Physikalische Parameter solubi-Usierter Membranproteine 122
3.2.3 Wie werde ich die Seife wieder los?124
4 Proteinnachweis durch Funktionsmessung 125
4.1 Translokatoren 125
4.1.1 Liposomen 127
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Index
AA-23187 133
Abstandshalter 164
Abstreifwirkung 119
Abzählreim 262
Abziehprogramm 306
Acetat-Färbung 20
Acetatpuffer 3
Acetonfällung 24
Acetonitril-Gradient 145
- N-Acetylaminosäure 318
Acetylcholin-Rezeptor 51
- N-Acetylglucosamin 162
Acetylglucosamin-Galactosyltrans ferase 51
- N-Acetylglucosamin-Rest 162
- N-Acetylgruppe 354 ß-N-acetyl-Hexosaminidase 358
- N-Acetylserin 319
- N-Acetylthreonin 319
Acrylamid 12
Acrylamidmonomer 223
Act-Ultrogel ACA-22 167
Additive 244
Adduktbildung 263
Addukt-Signal 237
adiabatisch 76
Adju-Prime 182
Adjuvans 182
Adler, M. 203
Adrenalin-Rezeptor 51
adrenalinsensitive Adenylat cyklase 51
Adsorptionsmatrize 130
Adsorptionsmethode 130
Affigel-10 167
Affigel-15 167
Affinitätschromatographie 162
affinitätsgereinigte Antikörper 185
Affinitätsmarker 168
Affinitätsreifung 180
Affinitätssäule 164
Affi-prep-Hz 166
Ag-Ablagerung 18
Ahn-Gel 13
Airfuge 59
aktivierte CH-Sepharose 167
aktivierte Gruppe 168 ß-Alaninester 168
Albertsson, P.-A. 53
Aldehydgruppe 197
alkalische Phosphatase 32
alkoholytische Deacetylierung 319
Alkylsilyl-Verbindung 145
allosterische Hemmung 86
all-trans-Konformation 127
Alu-Block 248
Aluminiumoxid-Partikel 144
Aminocaproinsäure 14
Aminopeptidase 281
Aminopeptidase N 283 2-Aminopyridin 356
Aminosäureanalyse 334
Ammoniumcyanat 214
Ammoniumhydroxid 351
Ammoniumsulfatfällung 149, 185
Amperometrie 355
Ampholin 150
Ampholyt 150
Amphomycin 343, 346
Amplifizierungsmöglichkeit 207
Analcim 160
Analysator 250
analytische IEF 150
Anionenaustauscher 149
Anthron 354
Antigen 179
- Kopplung 195
Antigenizität 179
Antigensäule 185
anti-idiotypische Antikörper 178, 191
anti-Liganden-Antikörper 191
anti-Maus-IgG-Sepharose 187
anti-Peptid-Antikörper 179
Antikörper 177
Antikörperchip 311
Antikörper-DNA-Chimäre 203
Antikörperlieferant 177
Antikörperproduzent 177
Antipain 141
Antiport 125
Antithrombin III 141
Aprotinin 141
Aptamer 314
Aquaporin 237
Äquilibrierungspotenzial 355
Äquorin 132, 135
Arbeitsbereich 4
Arbeitsgleichung 236
Arg-C 233
Ärger-Abschussliste 21713 C-Arginin 302
Arg-tag 169
Arsenazo III 132
Arsenit 340
Artefaktsignale 239
artinger-Gel 229
Arylazid 99
Arylazidgruppe 98
ASB-14 115, 213
ASB-16 115, 213
Asn-X-Thr/Ser Sequenzmotiv 339
Asolektin 127
Asp-N 233
ATP-splatendes Bindungsprotein (BiP) 51
Auflösungsfenster 267
Auflösungsvermögen 261
Aufnahmekapazität 128
Ausgangs-Ion 267
Ausgangsmaterial 140
Ausschlachten 174
Autoradiographie 35
Autorenliste 362
Avidinsäule 297
Azid 142
BB max 57
Bacteriorhodopsin 237
Bakterienstamm 303
Bandeiraea simplicifolia Lektin 163
B anden Verzerrung 12
BCA-Test 5
Beljian Red 8
Bell, P. 8
Benzamidin 141
B enzy ldimethy 1-n-hexadecylam-
monium-Chlorid 229
Bernsteinsäure 239 f
Bernsteinsäureanhydrid 328
Berührungspunkte 337
beschichtete Glasfaserfilter 62
BIACORE 64
Bibliothek 364
Bicinchonininsäure 5
Bierfässer 160
Bigchap 115
bildgebende Massenspektrometrie 308
Bindung 47
Bindungsansatz 60
Bindungsanzeiger 316
Bindungshemmung 86
Bindungskinetik 95
Bindungsmechanismus 57, 82-85
Bindungsprotein 38
Bindungsstelle 38
Bindungstest 56
Biogel 147
BioGel P 4 357
Biomarker 205
Biomathematik 323
b-Ion 272
Biotin-aminocaproyl-Hydrazid 340
Biotin-tag 296
biotinylierte Antikörper 189
Bisimidate 98
Biuret-Reaktion 5
Blaugel 14, 159
- Chromatographie 159
Blaum, K. 252
Blocken 31
blockierte N-Termini 318
Blot
- Effizienz 21
- Kammer 28
- Membran 27
Problem 28
Blotten 27
Blutentnahme 183
Blutsinus 184
B-Lymphocyten 177
Boer, A. de 289
Bolton-Hunter-Reagenz 41
Borhydrid 356
Bradford-Test 5
Brechungsindex 64
Breitbandfrequenz 269
Brij-58 115
Bromcyanspaltung 235
Bromoalkylgruppe 166
Bromoconduritol 346
Bruns, M. 53 ß-Bungarotoxin 109, 152
- oc-Bungarotoxinbindung 51
B-Zelle 18045 Ca 2+ 34
CCa 2+ -bindendes Protein 19
Ca 2+ -Bindung 34
Calciumphosphatmineral 157
Calmodulin 12, 34, 246
- Binde-Peptid 169
Caprioli, R. 308
Carbamylierung 214
Carbodiimid-Kopplung 165
Carbohydrazid 18
Carbonatlösung 117
Carboxymethylierung 232
Carboxypeptidase 281
Carboxypeptidase A 283
Carboxypeptidase B 283
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