DeutschesFachbuch.de : Der Experimentator: Immunologie Von Kai Bratke, Werner Luttmann, Michael Küpper, Daniel Myrtek

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Inhaltsverzeichnis
Vorwort zur 3. AuflageV
VorwortVI
ExkurseXII
AbkürzungenXIII
1 Antikörper 1
1.1 Des Antikörpers Eigenheiten 2
1.1.1 Molekülstruktur von Antikörpern 2
1.1.2 Die Antigen-Antikörper-Bindung 7
1.2 Herstellung von Antikörpern 7
1.2.1 Das Antigen 8
1.2.2 Die Wahl der Spezies 11
1.2.3 Antigenapplikation 12
1.2.4 Polyklonale Antikörper 15
1.2.5 Monoklonale Antikörper 19
1.2.6 Rekombinante Antikörper 22
1.3 Reinigung von Antikörpern 25
1.3.1"Quick and dirty" - Präzipitationsmethoden 27
1.3.2 Affinitätschromatographie 28
1.3.3 Klassische Methoden der Proteinreinigung 30
1.3.4 Aufreinigung von IgY aus Eigelb 33
1.3.5 Aufreinigung rekombinanter Antikörper 34
1.3.6 Wichtige analytische Techniken 35
1.4 Chemische Kopplung und Markierung von Antikörpern 38
1.4.1 Chemische Kopplung von Antikörpern an feste Phasen 39
1.4.2 Kopplung von Markerenzymen an Antikörper 41
1.4.3 Kopplung von Fluorochromen an Antikörper 43
1.4.4 Kopplung von Biotin 47
1.4.5 Markierung mit Gold 49
1.4.6 Markierung mit radioaktiven Isotopen 50
2 Zellseparation 53
2.1 Trennung nach Zellgröße und Zelldichte - Zentrifugationstechniken 53
2.1.1 Differenzialzentrifugation 54
2.1.2 Dichtegradienten-Zentrifugation 55
2.1.3 Separationsmedien 56
2.1.4 Gegenstromzentrifugation 66
2.2 Trennung nach zellspezifischen Oberflächenmolekülen 68
2.2.1 Adhäsion an Kunststoffoberflächen 68
2.2.2 Adhäsion an Nylonwatte 70
2.2.3 Erythrocyten-Rosettierung 71
2.2.4 Immunmagnetische Separation 73
2.2.5 Lysierende Antikörper 75
3 Durchflusscytometrie 77
3.1 Wie funktioniert das eigentlich?78
3.2 Fluoreszenzen 81
3.3 Probenvorbereitung 85
3.3.1 Zellmarkierung 85
3.4 Inbetriebnahme des Durchflusscytometers 90
3.5 Kompensation und Messung 92
3.5.1 Kompensation 92
3.5.2 Messung 97
3.6 Auswertung 101
3.6.1 Histogramm-Plot 101
3.6.2 Dot-Plot 101
3.6.3 Dichteplot 102
3.6.4 Konturplot 103
3.6.5 Isometrische Darstellung 103
3.7 Modelle und Ausstattungen 103
3.7.1 Autosampier 103
3.7.2 Zellsorter 104
4 Quantitative Immunoassays 107
4.1 Assaykonzepte 108
4.1.1 Der kompetitive Assay 109
4.1.2 Der Sandwich-Assay 110
4.1.3 Welches Assaykonzept für welche Anwendung?111
4.2 Radioimmunoassay (RIA)112
4.2.1 Historisches 112
4.2.2 Praktisches 113
4.3 Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA)115
4.3.1 Coaten, Blocken, Waschen 116
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Register
A- 7-AAD (7-Amino-Actinomycin D) 98, 208, 226, 233
AB 0-System 237
ABC 174
- Methode 176- (S)ABC 172
Aberglaube 267
Absolutskala 256
Absorptionsspektren 82
ABTS 118 f
ACD 59
Acridinorange 229, 242
Adhärenz-Methoden 69
Adjuvans, Freundsches 13
Adjuvanzien 12 f, 18
AEC 126
Affinität 7, 108
Affinitätschromatographie 28
Agglutination 191, 238-240
Akkumulationsreagenz 90
aktivierte Sepharose 204
Aktivkohle 113
Aldehydgruppen, freie 171
Alkalische Phosphatase 42, 118, 126, 134, 154
- Kopplung 42
Allophycocyanin (APC) 44, 46, 84
Alternativhypothese 258
- 7-Aminoactinomycin 226, 233 D 208
Aminopterin 21
Ammoniumpersulfat 141, 144
Ammoniumsulfat 33
Ammoniumsulfatfällung 27
Ammoniumsulfatpräzipitation 31
Anionenaustauscher 31 f Annexin V 232
anti-D-Prophylaxe 238
Anti-Fading 184
Antigen 8, 89, 244
Affinitätschromatographie 30
Antigen-Antikörper
- Bindung 7
- Komplex
Ausfällung 191
- Präzipitation 114
- Reaktion 107
Antigenapplikation 12
Antiglobulintest 239
Antikoagulanzien 59
Antikörper 1
Absorption bei 280 nm 37
- bispezifische 23 f
- chemische Kopplung 39
- fluoreszenzgekoppelte 81
- Fluorochrom-Markierung 43
- funktionelle Gruppen 38
- Herstellung 7
- Iodierungsreaktionen 51
- Kopplung 38
- Kopplungsreaktionen 40
- Lagerung 5
- lysierende 75
- Markierung 38
- Molekularmasse 37
- Molekülstruktur 2
- monoklonale 19
- polyklonale 15
- Präzipitation 27
- Quellen 26
- rekombinante 22 f
- single chain 22
Antikörperaufreinigung
- IgA 30
- IgD 30
- IgE 30
Antikörperbibliothek 24
Antikörper-Isotop 89
Antikörperisotypisierung 38
Antikörperreinigung 25
Affinitätschromatographie 28
- Nachweisstrategie 26
Antikörpersuchtest 238
Antikörpertiter 15
anti-Maus-IgG-Sepharose 203 f
APAAP 172, 174
APC (Allophycocyanin) 44, 46, 84
APED 163
APL
- Emission 44
- Kopplung 44
APMSF 34
Apoptose 227 f
Assays 226
apoptotic bodies 227
Äquivalenzzone 191
Argonionenlaser 79, 84
Ascites 179
- Technik 22
ATPAssay 210 f
Aufreinigung
- IgY 33
- rekombinanter Antikörper 34
Auslöschphänomen 196
Autofluoreszenz 84, 182
Autosampier 103 f
Avidin 47, 132 f
- Biotin-Complex 174
Avidität 7, 108
Azan 185
Azaserin 21
BBandpassfilter 80
BCIP/NBT 126
Beads 77
Benzamidin-HCI 34
Benzoinmethylether 187
Berson, S.A. 112
B 5-Fixativ 166 f
Biostatistik 247
Biotin 47, 132 f
- endogenes 171
- Kopplung 47
- Strukturformel 48
Biotinyl-Tyramid 175 f
Blocking 151
Blockinglösung 152
Blot 147
blotten 139
Blutentnahme 15
Blutgruppe 237
Blutgruppenbestimmung 237
Bolton-Hunter-Reagenz 51 f
Boost
- Immunisierung 17 f
- Injektion 12, 15
Bouin-Hollande-Fixativ 162, 168
Boxplot 253
Bradford-Test 36
BrdU 212
Bridged-Avidin-Biotin-System 132
- 5-Brom-2'-desoxyuridin 212 f
Bromcyan 40 f
BSA 116
Buoyant-Dichte 56
Ccapping 86
Caprylsäure 28
Carbodiimid 40, 166
- Verbindungen 41
Carboxyfluorescein-Diacetat (CFDA) 243
Casein 116
Caspase 233
- Aktivität 233
- Substrate 234
CD-Antigen 268
CFDA (Carboxyfluorescein-Diacetat) 243
CFSE 214, 225 f
Chemokin 291
Chloramin T 52
Chloroform 33
Chrom[51 Cr]-release-Assay 222 f
Chromatographie 32
- hydrophobe Interaktionschromatographie 31
- Hydroxyapatit 31
- Ionenaustauscher 31
Chromatographiematerial 32
Chymostatin 34
Contour-Plot, siehe Konturplot Coomassie Brilliantblau 149 G-250 36
Coombs-Test 239
Counterflow centrifugation 67
Crosslinking-Reagenzien 39
CS A 176
- Verstärkung 175
Cyan-Farbstoff 46
Cetokin 287
Cetologie 159
Cytospin 160
Cytotoxizitätsassay 221
- durchflusscytometrischer 225
DDAB 126, 174
DAPI 185, 229
Death-Rezeptoren 227
Demaskierung 170
Demi-Dry-Blot 150
Density-Plot 102
Desoxyribosyl-Transferase 232
Detektionsantikörper 110
Dextransulfat 28, 33
Diabody 23
Diaminobenzidin-tetrahydrochlorid 126
Dichtegradientenzentrifugation 5 5, 58
Dichteplot 102
Differenzialzentrifugation 54 f
Diisodecylphtalat 217
Diodenlaser 79
direkte Markierung 77, 85
- 1, 4-Dithiothreito 134
DNA-Leiter 229, 231
DNA-Leitermuster 227
DNase 34
Doppelantikörpertechnik 114
Dot-Blot 156 f
Dot-Plot 94, 101
Durchflusscytometer 77, 90, 103
EEDTA 34, 59
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